BCA法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度原理：

BCA與二價(jià)銅離子的硫酸銅等其他試劑組成的試劑混合一起即成為蘋果綠，即 BCA 工作試劑。在堿性條件下，BCA 與蛋白質(zhì)結(jié)合時(shí)，蛋白質(zhì)將 Cu2+ 還原為 Cu+，工作試劑由原來的蘋果綠色變?yōu)樽仙珡?fù)合物。562 nm 下其光吸收強(qiáng)度與蛋白質(zhì)濃度成正比。

BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒，遠(yuǎn)慕的蛋白質(zhì)定量試劑盒(BCA法)提供一個(gè)簡單，快捷，兼容去污劑的方法，準(zhǔn)確定量總蛋白。

成分：

試劑 A，100 mL

試劑 B，2 mL

標(biāo)準(zhǔn)蛋白(BSA)1 mL×2，1 mg/mL

保存條件運(yùn)輸溫度:室溫(標(biāo)準(zhǔn)蛋白 4~8 ℃ 運(yùn)輸)

保存溫度:室溫(標(biāo)準(zhǔn)蛋白 -20 ℃ 保存)

有效日期:12 個(gè)月

使用方法：

方法一:96 孔板

1.配制 BCA 工作液:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量，按 50 體積試劑 A，1 體積試劑 B 配制適量 BCA 工作液。充分混勻。

2.將蛋白標(biāo)準(zhǔn)品按 0 μL，1 μL，2 μL，4 μL，6 μL，8 μL，10 μL 加入 96 孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中。加滅菌雙蒸水補(bǔ)足到 10 μL。取 10 μL 待測(cè)樣品加入 96 孔板的待測(cè)樣品孔中。每個(gè)測(cè)定要做 2~3 個(gè)平行。

3.向待測(cè)樣品孔和蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中各加入 200 μL BCA 工作液(即樣品與工作液的體積比為 1:20)，混勻。

4.37 ℃ 溫浴 30 min。冷卻至室溫。

5.酶標(biāo)儀 562 nm 波長下測(cè)定吸光度。

6.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。從標(biāo)準(zhǔn)曲線中求出樣品濃度。