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【微生物實驗】無菌檢查法的對照用菌液制備
點擊次數(shù):162 更新時間:2025-03-20

無菌檢查法系用于檢査藥典要求無菌的藥品生物制品、醫(yī)療器具、原料、輔料及其他品種是否無菌的一種方法。

 

試驗前準備

無菌檢驗需在潔凈度達到100級或以上的實驗室進行,并確保該實驗室各項指標均符合GB50073—2001《潔凈廠房設計規(guī)范》以及GB/T16292~16294—1996《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》等相關標準。同時,洗脫液、需氧一厭氧培養(yǎng)基與真菌培養(yǎng)基的制備需遵循衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)的要求。

在無菌檢驗前三天,需在需氧一厭氧培養(yǎng)基與真菌培養(yǎng)基中分別接種1ml洗脫液,并在適宜的溫度下培養(yǎng)72小時,以確保無菌生長。此外,還需制備陽性對照管菌液,包括金黃色s葡萄球菌、生孢梭菌以及白念珠菌的稀釋液。

 

微生物無菌檢查法的對照用菌液制備:

1、無菌檢查法的對照用菌液—金黃色s葡萄球菌(Staphylococcus aureus)菌液取金黃色s葡萄球菌[CMCC(B)26003]的營養(yǎng)瓊脂斜面新鮮培養(yǎng)物1白金耳,接種至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基內(nèi),在30~35℃培養(yǎng)16~18小時后,用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至每1ml中含10~100個菌。

2、無菌檢查法的對照用菌液—生孢梭菌(Clostridium sporogenes)菌液取生孢梭菌[CMCC(B)64941]的需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基新鮮培養(yǎng)物1白金耳,接種至相同培養(yǎng)基內(nèi),在30~35℃培養(yǎng)18~24小時,用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至每1ml中含10~100個菌。

3、無菌檢查法的對照用菌液—白色念珠菌(Candida albicans)菌液取白色念珠菌[CMCC(F)98001]的真菌瓊脂培養(yǎng)基斜面新鮮培養(yǎng)物1白金耳,接種至真菌培養(yǎng)基內(nèi),在20~25℃培養(yǎng)24小時后,用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至每1ml中含10~100個菌。


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