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標(biāo)準(zhǔn)菌株的應(yīng)用以及管理的相關(guān)流程
點(diǎn)擊次數(shù):434 更新時(shí)間:2023-04-07

  一、標(biāo)準(zhǔn)菌株的概念及其應(yīng)用

  1.1標(biāo)準(zhǔn)菌株概念

  1)GB/T 27405-2008

  實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品微生物檢測(cè):

 ?、贅?biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物:標(biāo)準(zhǔn)菌株、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株和工作菌株的統(tǒng)稱。

 ?、跇?biāo)準(zhǔn)菌株:至少定義至屬或種水平的菌株。按其特征進(jìn)行分類和描述,有明確的來(lái)源。

 ?、蹣?biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株:標(biāo)準(zhǔn)菌株經(jīng)過(guò)一代轉(zhuǎn)接后獲得的同種菌株。

  ④工作菌株:由標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備轉(zhuǎn)接后獲得的同種菌株。

  1.2標(biāo)準(zhǔn)菌株的應(yīng)用:

  各種國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)等的相關(guān)微生物檢測(cè),用于驗(yàn)收培養(yǎng)基(包括試劑盒)、驗(yàn)證方法和評(píng)估實(shí)驗(yàn)操作。

  二、微生物菌種管理的相關(guān)流程

  2.1菌株的采集:

  實(shí)驗(yàn)室用菌種一是到國(guó)家法定機(jī)構(gòu)采購(gòu),二是購(gòu)買ATCC菌種,三是科研中菌種交流。不管是哪種來(lái)源,均統(tǒng)一采集。采集中嚴(yán)格按照規(guī)范執(zhí)行。要求包裝可靠,采集迅速,不泄漏不污染。保證菌種合格和環(huán)境安全。采集中要有菌種傳代標(biāo)識(shí)。選擇有資質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)菌株的合格供應(yīng)商,每批標(biāo)準(zhǔn)菌株必須附帶有供應(yīng)商的合格證或檢測(cè)報(bào)告或說(shuō)明書,來(lái)證明所采購(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)菌株是合格的。

  2.2標(biāo)準(zhǔn)菌株和驗(yàn)收

  實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)準(zhǔn)菌株,首先應(yīng)進(jìn)行符合性感官檢查,記錄菌株號(hào)和標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源途徑信息,確保溯源性清楚。同時(shí)還應(yīng)記錄標(biāo)準(zhǔn)菌株名稱和數(shù)量、生產(chǎn)日期、接收日期和有無(wú)破損等情況。

  2.3凍干標(biāo)準(zhǔn)菌株的復(fù)活

  2..3.1開(kāi)啟產(chǎn)品包裝:先用70%酒精棉擦拭外包裝,從凹口處撕開(kāi)產(chǎn)品外包裝,撕掉標(biāo)簽上的拉片,將其貼于菌株接收、保存記錄序號(hào)前面。

  2.3.2復(fù)活:選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件(根據(jù)生產(chǎn)商說(shuō)明或有關(guān)技術(shù)通則見(jiàn)附錄)進(jìn)行復(fù)活。菌種的首ci活化最好是在非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上,除非特殊情況或特別推薦,一般不用液體培養(yǎng)基。凍干菌株的傳代次數(shù)不得超過(guò)5代,從標(biāo)準(zhǔn)菌株保藏中心購(gòu)買的凍干標(biāo)準(zhǔn)菌株為第F0代。

  捏管帽處安瓿瓶(僅一次)使其釋放水合液體。垂直握住安瓿瓶并輕拍之,使液體流入含小球的管底。通過(guò)擠捏壓碎小球使其與液體混合,立即將拭子浸于水合液體。擠壓并旋轉(zhuǎn)拭子,接種于初級(jí)培養(yǎng)平板,接種圈的直徑約為25mm,用一無(wú)菌接種環(huán)在先前接種區(qū)域劃線10-20次,促使分離出單菌落。同時(shí)吸出部分菌液接種胰蛋白胨大豆肉湯管,副溶血性弧菌接種3%氯化鈉菌胰蛋白胨大豆肉湯管。將接種好的平板和管立即進(jìn)行培養(yǎng)。細(xì)菌培養(yǎng)溫度通常為25℃或37℃。多數(shù)凍干菌株會(huì)在幾天后長(zhǎng)出,但是少數(shù)菌會(huì)表現(xiàn)出延滯期延長(zhǎng)的現(xiàn)象,需要將正常培養(yǎng)時(shí)間加倍。復(fù)活后的菌株為F1代。

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