久久精品九九亚洲精品,国产我和岳拇看A片,欧美学生小嫩嫩XB,国产人妻丰满熟妇嗷嗷叫

上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

常見限制性內(nèi)切酶識(shí)別序列(酶切位點(diǎn))
點(diǎn)擊次數(shù):818 更新時(shí)間:2023-03-21

常見限制性內(nèi)切酶識(shí)別序列(酶切位點(diǎn))(BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI、XhoI等)

在分子克隆實(shí)驗(yàn)中,限制性內(nèi)切酶是bu不可少的工具酶。

無論是構(gòu)建克隆載體還是表達(dá)載體,要根據(jù)載體選擇合適的內(nèi)切酶(當(dāng)然,使用T載就不必考慮了)。先將引物設(shè)計(jì)好,然后添加酶切識(shí)別序列到引物5' 端。常用的內(nèi)切酶比如BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI、XhoI等可能你都已經(jīng)記住了它們的識(shí)別序列,不過為了保險(xiǎn)起見,還是得查證一下。

下面是一些常用的II型內(nèi)切酶的識(shí)別序列,僅供參考。遠(yuǎn)慕先介紹一下什么是II型內(nèi)切酶吧。

The Type II restriction systems typically contain individual restriction enzymes and modification enzymes encoded by separate genes. The Type II restriction enzymes typically recognize specific DNA sequences and cleave at constant positions at or close to that sequence to produce 5-phosphates and 3-hydroxyls. Usually they require Mg 2+ ions as a cofactor, although some have more exotic requirements. The methyltransferases usually recognize the same sequence although some are more promiscuous. Three types of DNA methyltransferases have been found as part of Type II R-M systems forming either C5-methylcytosine, N4-methylcytosine or N6-methyladenine.

酶類型識(shí)別序列ApaIType II restriction enzyme5'GGGCC^C 3'BamHIType II restriction enzyme5' G^GATCC 3'BglIIType II restriction enzyme5' A^GATCT 3'EcoRIType II restriction enzyme5' G^AATTC 3'HindIIIType II restriction enzyme5' A^AGCTT 3'KpnIType II restriction enzyme5' GGTAC^C 3'NcoIType II restriction enzyme5' C^CATGG 3'NdeIType II restriction enzyme5' CA^TATG 3'NheIType II restriction enzyme5' G^CTAGC 3'NotIType II restriction enzyme5' GC^GGCCGC 3'SacIType II restriction enzyme5' GAGCT^C 3'SalIType II restriction enzyme5' G^TCGAC 3'SphIType II restriction enzyme5' GCATG^C 3'XbaIType II restriction enzyme5' T^CTAGA 3'XhoIType II restriction enzyme5' C^TCGAG 3'

要查找更多內(nèi)切酶的識(shí)別序列,你還可以選擇下面幾種方法:

1. 查你所使用的內(nèi)切酶的公司的目錄或者網(wǎng)站;

2. 用軟件如:Primer Premier5.0或Bioedit等,這些軟件均提供了內(nèi)切酶識(shí)別序列的信息;

3. 推薦到NEB的REBASE數(shù)據(jù)庫去查

當(dāng)你設(shè)計(jì)好引物,添加上了內(nèi)切酶識(shí)別序列,下一步或許是添加保護(hù)堿基了,可以參考:



雙酶切buffer的選擇(MBI、羅氏、NEB、Promega、Takara)

遠(yuǎn)慕再給大家推薦一種新的不需要連接反應(yīng)的分子克隆方法,優(yōu)點(diǎn)包括:

①設(shè)計(jì)引物不必考慮選擇什么酶切位點(diǎn) ;

②不必考慮保護(hù)堿基的問題;

③不必每次都選擇合適的酶來酶切質(zhì)粒制備載體;

④而且不需要DNA連接酶;

⑤假陽性幾率低(因?yàn)闆]有連接反應(yīng)這一步,載體自連的問題沒有了)。

另外,還有一個(gè)經(jīng)濟(jì)問題:如果一次性制備一批載體(小提一次質(zhì)粒約80μL),并將之線性化(可雙酶切亦可單酶切),然后每次做分子克隆實(shí)驗(yàn)時(shí)用一點(diǎn),大約可以做約40次轉(zhuǎn)化,用一年沒問題!

上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司 版權(quán)所有 地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號(hào) 郵編:201202 電話: 管理登陸
傳真:021-58999639 手機(jī):13310162040 聯(lián)系人:俞燕熙 郵箱:m13310162040@163.com  GoogleSitemap 網(wǎng)址:m.8xgao.com ICP備案號(hào):滬ICP備14029423號(hào)-1
主營(yíng):ELISA試劑盒/染色液/溶液 /動(dòng)物血清/標(biāo)準(zhǔn)品/化學(xué)試劑
點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息
手機(jī):13310162040
成年免费a级毛片| 日韩av片无码一区二区不卡电影| 欧美激情性做爰免费视频| 三年片在线观看免费大全爱奇艺| 狠狠综合久久AV一区二区| 色婷婷丁香五月久久综合| 国产9色在线 | 日韩| 伊人成色综合人夜夜久久| 韩国a片巜上司与的人妻| 人妻免费久久久久久久了| 国产激情久久久久99蜜桃| 日韩一区二区三区精品| 国产国产乱老熟女视频网站97| 欧美黑人性暴力猛交喷水| 人妻出轨和黑人疯狂做国产人| 成人在色线视频在线观看免费社区| 欧美亚洲国产精品久久高清| 久久偷看各类WC女厕嘘嘘偷窃| 99麻豆久久久国产精品免费| 好男人www免费高清视频在线观看| 国产精品无码专区在线播放| 精品国产三级a∨在线| 久久婷婷五月国产色综合| 30分钟人性短片免费| 人妻丰满精品一区二区A片| 亚洲AV午夜成人片精品网站| 末成年女av片一区二区| 欧美大尺寸SUV欧美| 久久精品无码一区二区日韩av| 国产精品久久国产精麻豆99网站| 国产精品天干天干在线播放| 亚洲国产一区二区A毛片日本| 中日av乱码一区二区三区乱码| 欧美乱大交xxxxx疯狂俱乐部| 欧美群妇大交群| juliaann精品艳妇| 色欲国产精品久久毛片AV大全| 女人18毛片A片一区二区| 国产亚洲精品精华液| 国产手机精品一区| 老年人做爰片免费观看|