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重組蛋白真核表達(dá)系統(tǒng)與原核表達(dá)系統(tǒng)的區(qū)別
點擊次數(shù):517 更新時間:2023-03-20

  重組蛋白真核表達(dá)采用原核表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行研究,主要方法是將已克隆到目的基因DNA的片段的載體轉(zhuǎn)化到細(xì)菌中,通過IPTG誘導(dǎo)和終純化獲得所需的目的蛋白。其優(yōu)點是可以在短時間內(nèi)獲得基因表達(dá)產(chǎn)物,所需成本相對較低。

  目前的表達(dá)系統(tǒng)各有利弊,但一般理想的表達(dá)系統(tǒng)滿足以下幾點:一是特異性,不受其他內(nèi)源性因素影響,只能通過外源性無毒物激活。二是不干擾,不干擾細(xì)胞通路。以及誘導(dǎo)劑的誘導(dǎo)性、生物利用度、可塑性和劑量依賴性。

  因此,在選擇表達(dá)系統(tǒng)時,必須充分考慮各種因素,如蛋白質(zhì)性質(zhì)、實驗條件、生產(chǎn)成本、表達(dá)水平和安全性。權(quán)衡利弊后,選擇相應(yīng)的表達(dá)系統(tǒng)。

  原核表達(dá)系統(tǒng)與重組蛋白真核表達(dá)系統(tǒng)的區(qū)別:

  1.根本的區(qū)別是,原核表達(dá)系統(tǒng)的表達(dá)系統(tǒng)是原核細(xì)胞;真核表達(dá)系統(tǒng)在真核細(xì)胞如酵母細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和哺乳動物細(xì)胞中表達(dá)。

  2.兩種表達(dá)系統(tǒng)都通過含有原核或真核啟動子和其他表達(dá)相關(guān)元件的質(zhì)粒系統(tǒng)表達(dá)外源基因。

  3.與真核表達(dá)系統(tǒng)相比,原核表達(dá)系統(tǒng)的表達(dá)效率易于優(yōu)化和調(diào)整,表達(dá)量高。然而,當(dāng)用于表達(dá)真核外源基因時,由于不同的蛋白質(zhì)折疊和糖鏈修飾,其應(yīng)用受到限制。真核表達(dá)系統(tǒng)的表達(dá)量相對較低。雖然酵母和昆蟲系統(tǒng)的表達(dá)量相對較高,但哺乳動物基因的表達(dá)也存在不足。

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