菌落總數檢測

1、為什么平板計數瓊脂需要調節(jié)pH？

由于大部分細菌是嗜中性的，培養(yǎng)基為符合細菌生長要求，需要調節(jié)pH至7.0±0.2，盡量保證較適宜的環(huán)境，確保檢測結果的準確性。

2、如何保證檢測結果的有效性？

設計空白對照

（1）檢驗過程中需要做空白對照，用來判斷培養(yǎng)基、稀釋液、平皿或吸管是否存在污染，完/美的空白試驗平板上應該無細菌生長。

實驗環(huán)境要求

（2）定期檢測空氣潔凈度，判斷實驗環(huán)境是否符合標準要求。

滅菌處理

（3）細菌檢測過程中所用到的一切用具和培養(yǎng)基都需經過滅菌程序。

3、如何提高檢測結果的準確性？

樣品消毒

（1）任何樣品在打開包裝前，都要在取樣開口處的周圍表面進行消毒。

（2）采樣時對于易堵塞吸管的樣品（如糕點面包辣條等），可以放置一塊無菌紗布在放樣液的容器瓶口下方，作過濾用。

稀釋度選擇

（3）不同的食品其「菌落總數」的檢出限/量也不一致，通常糕點類樣品中細菌量偏低，稀釋度應選擇較小的，稀釋度可選1:10 。

4、為什么瓊脂凝固后需要倒置？

平板倒置培養(yǎng)，可以減少培養(yǎng)基中水分的蒸發(fā)影響細菌生長，又可以防止凝結在皿蓋上的水蒸氣流到培養(yǎng)基表面導致染菌出現(xiàn)菌落蔓延及難以計數。

5、為什么培養(yǎng)基干裂？

干裂是培養(yǎng)基的水份缺失導致，通常2種原因：

（1）培養(yǎng)箱內部溫度不穩(wěn)定導致；

（2）培養(yǎng)基倒得太薄。

6、菌落蔓延的原因及解決辦法？

菌落蔓延主要有兩個原因，一是操作不當；二是樣品中含有變形桿菌等運動性強的細菌。

操作中需要注意3個關鍵點：

（1）傾注培養(yǎng)基時搖晃平皿使其混合均勻，減少菌塊；

（2）樣品稀釋后，盡快傾注平板。從稀釋到傾注結束時間控制在30分鐘之內，避免樣液干涸造成菌落成團；平板凝固后馬上倒置；

（3）若樣品中含有變形桿菌，則可以覆蓋一層培養(yǎng)基（約4mL）。

7、異?，F(xiàn)象平板如何進行菌落計數？

在完成培養(yǎng)后應立即進行計數，通常選取30-300CFU菌落數、無蔓延菌落生長的平板作為計數，但實際操作中會出現(xiàn)各種異?，F(xiàn)象。

另外，當所有稀釋度的平板均無細菌生長，則檢測報告應以最/低稀釋度報出，如最/低稀釋度為1，則報為＜1；若最/低稀釋度為1:10，則報為＜10，而不能報為「未檢出」。