一.實(shí)驗(yàn)前

1.1實(shí)驗(yàn)用工器具的準(zhǔn)備：檢測(cè)過(guò)程中用到的玻璃平皿需滅菌(濕熱滅菌121℃、30分鐘或干熱滅菌160℃、2小時(shí))備用;剪刀、鑷子等需先用紗布包好，外包牛皮紙包好扎緊，滅菌(濕熱滅菌121℃、30分鐘);移液管、槍頭等用報(bào)紙包好扎緊，滅菌(濕熱滅菌121℃、30分鐘)。

1.2培養(yǎng)基及稀釋液的準(zhǔn)備：根據(jù)檢驗(yàn)樣品，計(jì)算出培養(yǎng)基與稀釋液的用量，按照比例進(jìn)行配置，包好，根據(jù)培養(yǎng)基與稀釋液的屬性，進(jìn)行濕熱滅菌，備用。

1.3潔凈服準(zhǔn)備：將當(dāng)天所用潔凈服放入滅菌鍋中進(jìn)行滅菌，備用;或使用已滅菌且在有效期內(nèi)的潔凈服。

1.4確保實(shí)驗(yàn)潔凈區(qū)域通風(fēng)，觀察潔凈室各個(gè)規(guī)定區(qū)域的壓差是否符合規(guī)定，若不符合，及時(shí)通知設(shè)備部門(mén)，進(jìn)行調(diào)整。

二.實(shí)驗(yàn)中

2.1將實(shí)驗(yàn)所需的平皿、培養(yǎng)基、工器具、稀釋液放入傳遞窗中，打開(kāi)紫外燈，照射30分鐘。

2.2進(jìn)入潔凈區(qū)域，手清潔消毒，換上潔凈服，進(jìn)入檢查室，打開(kāi)潔凈工作臺(tái)通風(fēng)，用消毒劑擦拭臺(tái)面，取出傳遞窗中照射后物品，按照使用先后順序置于潔凈工作臺(tái)上，擺好后紫外照射30分鐘，人員退出檢查室，紫外照射結(jié)束后，繼續(xù)通風(fēng)30分鐘，檢測(cè)人員方可進(jìn)入檢查室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

2.3實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需點(diǎn)酒精燈，拆開(kāi)滅菌后包好的培養(yǎng)基外層，在近火焰處輕微灼燒培養(yǎng)基瓶口，打開(kāi)瓶蓋，傾倒培養(yǎng)基至滅菌后的平板中，待冷凝后使用。

三.實(shí)驗(yàn)后

3.1清潔及衛(wèi)生：做完實(shí)驗(yàn)后，用消毒劑對(duì)操作臺(tái)面進(jìn)行擦拭消毒，待實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)物和實(shí)驗(yàn)廢棄物傳出潔凈區(qū)域后，使用純化水對(duì)地面進(jìn)行清潔。

3.2培養(yǎng)及結(jié)果觀察：需氧菌平板應(yīng)在30-35℃下，培養(yǎng)3-5天，霉菌與酵母菌平板應(yīng)在20-25℃下，培養(yǎng)5-7天，空白與陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。