DNA合成阻斷法：選用DNA合成抑制劑，可逆地抑制DNA合成，而不影響其他時(shí)期細(xì)胞的運(yùn)轉(zhuǎn)，最終可將細(xì)胞群阻斷在S期或G1/S交界處。羥基/脲、阿糖胞苷、氨甲蝶呤、高濃度AdR(脫氧腺苷)、GdR(脫氧鳥苷)和TdR，均可抑制DNA合成，使細(xì)胞同步化。

其中高濃度TdR對(duì)S期細(xì)胞的毒性較小，因此常用TdR雙阻斷法誘導(dǎo)細(xì)胞同步化：在細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的培養(yǎng)基中加入過(guò)量TdR-（Hela細(xì)胞系，2mol/L；CHO細(xì)胞系，7.5mol/L），S期細(xì)胞被抑制，其他細(xì)胞繼續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)，最后停在G1/S交界處，棄去TdR，洗滌細(xì)胞并加入新鮮培養(yǎng)液，細(xì)胞又開始分裂。當(dāng)釋放時(shí)間大于Ts時(shí)，所有細(xì)胞均脫離S期，再次加入過(guò)量TdR，細(xì)胞繼續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)至G1/S交界處，被過(guò)量TdR抑制而停止。

該方法的優(yōu)點(diǎn)是同步化程度高，適用于任何培養(yǎng)體系，可將兒乎所有的細(xì)胞同步化。

缺點(diǎn)是產(chǎn)生非均衡生長(zhǎng)現(xiàn)象，個(gè)別細(xì)胞體積增大。