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ELISA試劑盒對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性怎么辦
點(diǎn)擊次數(shù):520 更新時(shí)間:2022-03-07
  ELISA基本原理是把抗原或抗體在不損壞其免疫活性的條件下預(yù)先結(jié)合到某種固相載體表面,測(cè)定時(shí),將受檢樣品(含待測(cè)抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按一定程序與結(jié)合在固相載體上的抗原或抗體起反應(yīng)形成抗原或抗體復(fù)合物,經(jīng)洗滌去除反應(yīng)液中其他物質(zhì),加入酶反應(yīng)底物后,在酶的催化下變?yōu)橛猩镔|(zhì),最后通過(guò)定性或定量分析有色產(chǎn)物量即可確定樣品中被測(cè)物質(zhì)量。
  ELISA試劑盒的保質(zhì)期一般都是在一年,如果保存得當(dāng)?shù)脑?,不?huì)出現(xiàn)問(wèn)題的。但不要反復(fù)凍融。當(dāng)然如果是正常的DAS-ELISA檢測(cè)試劑盒等,應(yīng)該放在4℃左右冰箱保存。建議ELISA試劑盒解凍后一次用完。已開(kāi)封或者使用后,剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,ELISA檢測(cè)試劑盒開(kāi)封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
  但要注意的是,如果將ELISA試劑盒剛從冰箱里面拿出來(lái)就立即使用的話,可能會(huì)影響,其直接的后果是對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性。
  建議:先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20分鐘以上后,再進(jìn)行測(cè)定,以使試劑盒在ELISA檢測(cè)試劑盒使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達(dá)到所要求的高度,以滿(mǎn)足測(cè)定要求。
  elisa的板子什么情況下會(huì)失效?
  1.通常商品化的酶標(biāo)板要求密閉4℃保存,長(zhǎng)時(shí)間暴露或未密閉保存,要么失效,要么結(jié)果為非可靠數(shù)據(jù);如果是自己包的板,可能效期更短,保存條件要求更高,至于顯色劑,正常條件下一天內(nèi)不會(huì)失效的。
  2.第三板是否*按照前兩板加所有試劑,如果缺失其中某一步驟,結(jié)果也會(huì)無(wú)色。
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