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木瓜蛋白酶生產(chǎn)的方法
點(diǎn)擊次數(shù):1421 更新時(shí)間:2019-08-26

木瓜蛋白酶,又稱木瓜酶,是一種蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜中含有的一種低特異性蛋白水解酶,廣泛地存在于番木瓜的根、莖、葉和果實(shí)內(nèi),其中在未成熟的乳汁中含量豐富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸,屬于巰基蛋白酶,它具有酶活高、熱穩(wěn)定性好、天然衛(wèi)生安全等特點(diǎn),因此在食品、醫(yī)藥、飼料、日化、皮革及紡織等行業(yè)得到廣泛應(yīng)用。

由木瓜的未成熟果實(shí),經(jīng)提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工業(yè)上以粗制品的應(yīng)用為主。木瓜蛋白酶韻生產(chǎn)方法有三種,分別是直接熱風(fēng)烘干法、噴霧干燥法及膜分離凍干法。

直接烘干

生產(chǎn)方法較簡(jiǎn)單、快速,但生產(chǎn)出來(lái)的成品只是粗酶,雜質(zhì)多、色澤差且微生物超標(biāo),酶活力也較低,只有60萬(wàn)~80萬(wàn)單位/g。多為個(gè)體工廠采用,已不能滿足國(guó)內(nèi)食品質(zhì)量衛(wèi)生安全等。

噴霧干燥

此法是先通過(guò)離心去除部分雜質(zhì)后再進(jìn)行噴霧干燥,所生產(chǎn)出的成品酶活力相對(duì)高,達(dá)到100萬(wàn)單位/g左右,雜質(zhì)相對(duì)也較少,色澤相對(duì)也較白。但產(chǎn)品噴霧時(shí)容易粘壁,酶活損失較大,水溶性相對(duì)也較差,而且酶活穩(wěn)定性也較差。

膜分離法

該生產(chǎn)方法不但避免了以上兩種方法的缺點(diǎn),且生產(chǎn)過(guò)程衛(wèi)生安全,收率也高,所生產(chǎn)的成品酶活損失小,酶活力一般可達(dá)到280萬(wàn)~350萬(wàn)單位/g,gao可達(dá)400萬(wàn)單位/g,且酶活穩(wěn)定性好,純度高,色澤潔白,細(xì)菌數(shù)低,嚴(yán)格操作可達(dá)到醫(yī)藥級(jí)別。

其提取工藝條件為超聲波功率300W,超聲處理時(shí)間200s,果漿質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%;經(jīng)超聲波強(qiáng)化提取,酶活力提高到原先的1.71倍;該酶在40℃以下,pH為5.4~6.0時(shí)酶活力相對(duì)穩(wěn)定;EDTA、Cys和維生素C對(duì)酶活力具有激活作用,CuS04和ZnCl2具有抑制作用,而KCl、NaCI、CaCl2、MgS04對(duì)酶活力的影響不大。

木瓜蛋白酶的分離純化工藝

采用初步采集處理,20%、40%硫酸銨分級(jí)沉淀、SP-sephadexC50柱色譜、羥基磷灰石柱色譜,從番木瓜乳汁中分離純化木瓜蛋白酶??色@得比活為1184U/mg的純酶,活力回收率為55.79%,純度達(dá)到99.31%,為高純度的木瓜蛋白酶。

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