組織線粒體分離試劑盒相關(guān)咨訊由上海遠(yuǎn)慕【進(jìn)口 國產(chǎn)】標(biāo)準(zhǔn)品對照品廠家提供詳細(xì)講述，本司現(xiàn)貨供應(yīng)不同類別的試劑盒，動物血清，培養(yǎng)基，抗體，抗原，實(shí)驗(yàn)耗材，染色液，溶液，緩沖液，標(biāo)準(zhǔn)品，對照品，化學(xué)試劑，生化試劑及其他試劑等，品種齊全，價(jià)格實(shí)惠，歡迎訂購!
【信息說明】
產(chǎn)品名稱：組織線粒體分離試劑盒
供應(yīng)商：遠(yuǎn)慕標(biāo)準(zhǔn)品對照品廠家
規(guī)格：50T
分類：細(xì)胞組分分離
儲存條件：-20℃,12個(gè)月
用途：快速分離動物硬組織(如骨骼肌)中的線粒體的試劑盒
注意事項(xiàng)：快速便捷分離動物硬組織(如骨骼肌)中的線粒體的試劑盒,分離線粒體的同時(shí)可以獲得去除線粒體的細(xì)胞漿蛋白,可用于分析細(xì)胞色素C等線粒體蛋白向胞漿的釋放,大部分獲得的線粒體都含有完整的內(nèi)膜和外膜,并具有線粒體的生理功能(如檢測線粒體膜電位),獲得的蛋白可用于SDS-PAGE、Western、雙向電泳等蛋白分析。
【簡介說明】
組織線粒體分離試劑盒(Tissue Mitochondria Isolation Kit)是快速便捷分離動物組織中的線粒體的試劑盒，分離線粒體的同時(shí)可以獲得去除線粒體的細(xì)胞漿蛋白，可用于分析細(xì)胞色素C等線粒體蛋白向胞漿的釋放，大部分獲得的線粒體都含有完整的內(nèi)膜和外膜，并具有線粒體的生理功能(如檢測線粒體膜電位)，獲得的蛋白可用于SDS-PAGE、Western、雙向電泳等蛋白分析。
該試劑盒可用于從動物軟組織(如腦、肝臟)和硬組織(心肌、骨骼肌)中提取線粒體，對于采用該試劑盒提取硬組織線粒體效果不佳者，建議采用Leagene硬組織線粒體分離試劑盒。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。
【操作步驟】
1、清洗：取新鮮組織(不宜采用凍存的組織)，迅速稱重50～100mg，用預(yù)冷的PBS清洗1次，冰上剪成3mm2大小的組織碎片。
2、勻漿裂解：加入預(yù)冷的Mitochondria Lysis buffer(如需獲得細(xì)胞漿蛋白，應(yīng)提前加入PMSF，至PMSF濃度為1×)，置于冰浴上Dounce勻漿器中勻漿。 不同組織或不同勻漿器所需的勻漿次數(shù)有所不同，需自行優(yōu)化。
3、離心以去除細(xì)胞核、未破碎的細(xì)胞和大的膜碎片。
4、上清液轉(zhuǎn)移至一干凈離心管離心。
5、棄上清，沉淀為線粒體，如果希望獲得去除線粒體的細(xì)胞漿蛋白，應(yīng)在本步驟中收集上清，并且在收集上清時(shí)注意勿觸及沉淀。
6、保存：棄上清，用適當(dāng)緩沖液懸浮沉淀。如果用于線粒體酶活性或功能的分析，線粒體沉淀應(yīng)重懸于Mitochondria Stock buffer;如果用于線粒體蛋白的分析，獲得的細(xì)胞漿蛋白應(yīng)保存于1×Protein Stock buffer，即按細(xì)胞漿蛋白：Protein Stock buffer (5×)=1:4比例混合;如果用于雙向電泳，應(yīng)使用恰當(dāng)?shù)谋４嬉骸?/span>
【注意事項(xiàng)】
1、試劑 (如PMSF)對于不同實(shí)驗(yàn)不必全部使用，在實(shí)驗(yàn)條件成熟后可以不必使用。
2、如果不是用于制備線粒體蛋白，Mitochondria Lysis buffer不必加入PMSF。如果用于制備線粒體蛋白樣品，Mitochondria Lysis buffer需添加PMSF。
3、分離線粒體的所有步驟均需在冰上或4℃進(jìn)行，所用溶液需冰浴或4℃預(yù)冷，全部操作時(shí)間盡量控制在1h以內(nèi)。
4、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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