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上海遠慕生物科技有限公司

犬維生素K1(VK1)ELISA試劑盒使用說明書
點擊次數(shù):1828 更新時間:2018-04-16

上海遠慕生物科技詳細為您介紹犬維生素K1(VK1)ELISA試劑盒的參數(shù)說明,操作步驟,注意事項,樣品收集等詳情,本司提供ELISA試劑盒免費代測服務(wù),一周內(nèi)出結(jié)果,ELISA種屬有:大鼠ELISA檢測試劑盒,小鼠ELISA檢測試劑盒,人ELISA試劑盒,馬ELISA檢測試劑盒,羊ELISA檢測試劑盒,猴ELISA試劑盒,豬ELISA試劑盒,狗ELISA檢測試劑盒,植物ELISA試劑盒,猴ELISA試劑盒,其他動試劑盒,訂購!

 

【參數(shù)說明】

中文名:犬維生素K1(VK1)ELISA試劑盒

別名:犬維生素K1(VK1)ELISA Kit

供應(yīng)商:上海遠慕

規(guī)格:48t/96t

保存:2~8℃

有效期:6個月

樣本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

特點:敏感性高、特異性強、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。

用途:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。

種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。

檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

 

【操作步驟】

1、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。

3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此

  重復(fù)5次,拍干。

5、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

6、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

  10 分鐘。

7、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

8、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

 

【樣品收集】

1、血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。

2、血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。

3、組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

4、細胞培養(yǎng)上清:取細胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。

5、其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測

6、樣品應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。

7、樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內(nèi)檢測),或-80℃(6個月內(nèi)檢測),避免反復(fù)凍融。

8、如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品zui高值,請根據(jù)實際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù))。

 

【注意事項】

1、實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

2、試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。

3、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。

4、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

5、洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。

6、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

7、加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

8、按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

9、底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子,底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下,避免用手接觸,有毒,實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

 

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