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【植物血球凝集素PHA-P】用途_簡(jiǎn)介說(shuō)明_試劑準(zhǔn)備_注意事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù):1960 更新時(shí)間:2018-04-10

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【植物血球凝集素PHA-P】詳細(xì)說(shuō)明

【簡(jiǎn)介說(shuō)明】

植物血球凝集素(Phytohaemagglutinin,PHA) 也稱植物血凝素,為低聚糖(由D一甘露糖、氨基葡萄糖酸衍生物所構(gòu)成)與蛋白質(zhì)的復(fù)合物,屬于高分子糖蛋白類,存在于一些豆類種子中,對(duì)紅細(xì)胞有一定凝集作用故名。

 

【試劑準(zhǔn)備】

1、TE: 10mM Tris-HCl (pH 7.8); 1mM EDTA (pH 8.0)。

2、TBS: 25mM Tris-HCl (pH 7.4); 200mM NaCl; 5mM KCl。

3、裂解緩沖液:250mM SDS; 使用前加入蛋白酶K至100mg/ml。

4、20% SDS

5、2mg/ml蛋白酶K

6、Tris飽和酚(pH 8.0)、酚/lv仿(酚∶lv仿=1∶1)、lv仿

7、無(wú)水乙醇、75%乙醇

 

【用途】

PHA是一種促細(xì)胞分裂原(mitogen)。在體外能刺激小淋細(xì)胞轉(zhuǎn)化成具有免疫活性的淋細(xì)胞,并促進(jìn)其分裂。轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞能分泌各種淋巴因子。

1、PHA對(duì)外周周血淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化作用。外周血淋巴細(xì)胞與PHA在體外一起培養(yǎng),可使小淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞。

2、PHA刺激淋巴細(xì)胞有絲分裂。

3、PHA能增強(qiáng)淋巴細(xì)胞玫瑰花環(huán)率,可用以判斷機(jī)體細(xì)胞免疫功能。

4、PHA有促進(jìn)腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬作用。

5、PHA能誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞移動(dòng)抑制因子。

6、PHA能用于淋巴細(xì)胞亞太群研究。

 

【注意事項(xiàng)】

1、所有用品均需要高溫高壓,以滅活殘余的DNA酶。

2、所有試劑均用高壓滅菌雙蒸水配制。

3、用大口滴管或吸頭操作,以盡量減少打斷DNA的可能性。

4、用上述方法提取的DNA純度可以滿足一般實(shí)驗(yàn)(如Southern 雜交、PCR等)目的。如要求更高,可參考有關(guān)資料進(jìn)行DNA純化。

 

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