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脫氧核糖核酸酶Ⅰ用途
點(diǎn)擊次數(shù):1466 更新時(shí)間:2018-04-08

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脫氧核糖核酸酶Ⅰ說明

脫氧核糖核酸酶Ⅰ是zui有代表性的核酸內(nèi)切酶。zui早是由M.Kunitz從胰臟中分離出結(jié)晶的,也稱為胰脫氧核糖核酸酶或DNaseⅠ, EC3.1.21.1。分子量約3.1萬,等電點(diǎn)pH4.7,zui適PH 7附近,需要Mg2 和Mn2 。分離單鏈和雙鏈DNA,產(chǎn)生具有 5′-磷酸末端的分解物。在一般條件下其分解產(chǎn)物含有1到8—12個(gè)寡聚核苷酸,平均大小等于四個(gè)核苷酸。反應(yīng)初期似乎是先分解dpPupPy鍵,但因二價(jià)離子的存在對(duì)切斷的方式有顯著影響。因此酶容易得到結(jié)晶,所以于核酸的研究上廣泛應(yīng)用;又由于對(duì)整個(gè)結(jié)構(gòu)已經(jīng)明確,因而也是酶化學(xué)研究的材料。

脫氧核糖核酸酶Ⅰ用途

脫氧核糖核酸酶Ⅰ

 

脫氧核糖核酸酶Ⅰ用途

用于分子生物學(xué)研究。降解DNA的各種酶。這些酶使糖-磷酸酯主鏈上的磷酸二酯鍵水解。此類酶分為兩種:外切核酸酶和內(nèi)切核酸酶。DNAase種類很多,有些為單鏈特異的,有的為雙鏈特異性的,或序列特異性(如限制性內(nèi)切酶)。限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)特定堿基序列有識(shí)別能力,此一特性已用于基因操作技術(shù)中,以構(gòu)建人工克隆。

 

脫氧核糖核酸酶Ⅰ性狀

為雙鏈特異性內(nèi)切核酸酶,能降解雙鏈DNA成為具有5ˊ-磷酸及3ˊ-OH末端的寡脫氧核糖核苷酸。當(dāng)有一價(jià)錳離子存在時(shí),亦能降解單鏈DNA。溶于水,微溶于30%乙醇和丙酮。酶反應(yīng):脫氧核糖核酸→二核苷酸5′磷酸+寡聚核苷酸5′磷酸zui適pH 7.8。吸光系數(shù)(E1%280)11.1。激活劑為二價(jià)金屬離子,zui大激活可以從鎂(Mg2+)+鈣(Ca2+)得到。抑制劑有EDTA和十二烷基硫酸鈉。可加5mmol/L鈣(Ca2+)

 

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