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【環(huán)氧活化-瓊脂糖凝膠6B】參數(shù)說明_操作步驟_注意事項(xiàng)_簡(jiǎn)介
點(diǎn)擊次數(shù):2506 更新時(shí)間:2018-04-02

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【環(huán)氧活化-瓊脂糖凝膠6B】參數(shù)說明_操作步驟_注意事項(xiàng)_簡(jiǎn)介

【環(huán)氧活化-瓊脂糖凝膠6B】詳細(xì)說明

 

【環(huán)氧活化-瓊脂糖凝膠6B參數(shù)說明】

中文名:環(huán)氧活化-瓊脂糖凝膠6B

中文別名:Epoxy活化瓊脂糖凝膠6B

英文名稱:Epoxy-activated Sepharose 6B

供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕

基質(zhì):6%高度交聯(lián)瓊脂糖凝膠

功能基團(tuán):epoxy

配基密度:20-40μmoles/mL drained matrix

平均粒徑:90μm

zui大流速:300cm/h

用途:親和層析介質(zhì)

性狀:白色膠體

儲(chǔ)存溫度:4-8°C

偶聯(lián)條件:pH8-10,溫度 4-45°C,時(shí)間1-16小時(shí),可在水相和有機(jī)相中偶聯(lián)

 

【環(huán)氧活化-瓊脂糖凝膠6B操作步驟】

該環(huán)氧活化瓊脂糖凝膠介質(zhì)可以和含有氨基、巰基或羥基的親和配基的蛋白質(zhì)、多肽、糖等物質(zhì)偶聯(lián)。具體的偶聯(lián)方法如下(偶聯(lián)BSA為例):

洗滌:用10-20倍膠體積的去離子水沖洗保存存儲(chǔ)液中的環(huán)氧活化膠,除去存儲(chǔ)液,抽干。

偶聯(lián):稱取200mg BSA,溶于10ml 0.1M pH 9.0碳酸鈉緩沖液,加入到洗滌抽干的活化膠中,在37℃搖床上振蕩12-24h偶聯(lián),偶聯(lián)完畢后將料液轉(zhuǎn)移到砂芯漏斗中抽干。

封閉:將抽干的偶聯(lián)BSA的膠加入到100 ml三角瓶中,加入30 ml 1 mol/L乙醇胺溶液。攪拌速度120 rpm,37 ℃條件下反應(yīng)4h,然后將料液轉(zhuǎn)移到砂芯漏斗中抽干。

清洗:然后依次用5倍的去離子水、0.1 M含0.5M NaCl的乙酸-乙酸鈉緩沖液(pH 4.0)、去離子水、0.1M含0.5M NaCl的硼酸-四硼酸鈉緩沖液(pH 8.0)和去離子水充分洗滌后,抽干。

保存:保存于4℃、20%乙醇溶液中。

  

【環(huán)氧活化-瓊脂糖凝膠6B注意事項(xiàng)】

1、不同配基的偶聯(lián)方法與上面類似,但是反應(yīng)的條件例如:配基加入量,反應(yīng)時(shí)間,反應(yīng)溫度應(yīng)根據(jù)配基的不同進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。

2、可用碳酸鹽、硼酸鹽和磷酸鹽緩沖液做為偶聯(lián)緩沖液,但不能使用含有氨基的Tris、甘氨酸的緩沖液。

 

【環(huán)氧活化-瓊脂糖凝膠6B簡(jiǎn)介】

環(huán)氧活化-瓊脂糖凝膠6B以6%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),采用環(huán)氧活化的方法激活瓊脂糖上的羥基,活化后即可直接用于各種配基的偶聯(lián)??捎糜诟鞣N含有氨基、巰基或羥基的親和配基(蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸或糖等)的偶聯(lián)。具有使用方便、偶聯(lián)條件溫和、偶聯(lián)效率高和應(yīng)用范圍廣的特點(diǎn)。

 

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