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葡聚糖凝膠LH-60分離原理
點擊次數(shù):3112 更新時間:2018-01-16

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中文名:葡聚糖凝膠LH-60

中文別名:交聯(lián)葡聚糖凝膠LH-60;交聯(lián)右旋糖酐

英文名:Sephadex LH-60

供應商:上海遠慕

PH穩(wěn)定值:2~11

操作溫度:4~40℃

顆粒直徑:18~111um

球蛋白分離范圍:400~20000

性狀:白色珠?;蚍勰?,屬親脂性凝膠;在san氯甲烷里面用,分離是400-2萬,在甲醇或水中用,分離是400-1萬,可用有機溶劑為流動相,分離脂溶性物質(zhì)

用途:適用于凝膠過濾,天然產(chǎn)物在有機溶劑中的純化。

葡聚糖凝膠LH-60分離原理

葡聚糖凝膠LH-60分離原理

分離原理

主要有兩方面:以凝膠過濾作用為主,兼具反相分配的作用(在反相溶劑中);因為凝膠過濾作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脫下來,小分子的化合物保留強,zui后出柱;如果使用反相溶劑洗脫,葡聚糖凝膠LH-60對化合物還起反相分配的作用,所以極性大的化合物保留弱,先被洗脫下來,極性小的化合物保留強,后出柱;如果使用正相溶劑洗脫,這主要靠凝膠過濾作用來分離。

 

分離技巧:

1、分離時流速不可太快,切切不可心急,所謂欲速則不達;接餾分時可開全速,節(jié)省時間。

2、柱子盡可能長,葡聚糖凝膠柱長的增加將極大地改善分離,所不要吝惜填料,寧可將填料全裝在一根大柱子中,不要將填料裝成幾根小柱。所謂集中優(yōu)勢兵力,打擊敵人。

3、餾分一定要接的細,可1/10,或1/20 個保留體積接成一餾分。

4、洗脫體積一般為2-3個保留體積,對特殊保留強的化合物,可洗脫5個保留體積。

5、鞣質(zhì)成分死吸附嚴重,如不在乎填料者,可用Sephadex LH20 分鞣質(zhì)

6、葡聚糖凝膠對黃酮類成分的分離效果,方法很成型,有大量文獻參考。

7、填料反復使用,每次用完,一般可用甲醇將柱子洗干凈,然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來,待用。暫時不用試可以水洗→含水醇洗(醇的濃度逐步遞增)→醇洗,zui后泡在醇中貯于磨口瓶中備用。如長期不用時,可在以上處理基礎上,減壓抽干,再用少量乙迷洗凈抽干,室溫充分揮散至無醚味后,60~80°C干燥后保存。

 

注意事項:

1、試劑不能與手接觸。

2、要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不準用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑;取完一種試劑后,應將工具洗凈(藥勺要擦干)后,方可取用另一種試劑。

3、試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處。

4、已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi);另外取用試劑時應本著節(jié)約精神,盡可能少用,這樣既便于操作和仔細觀察現(xiàn)象,又能得到較好的實驗結(jié)果。

 

層析原理

1、凝膠過濾:依賴于分子的大小和形狀

2、吸附層析:依賴于被分離化合物與凝膠之間的氫鍵數(shù)量和質(zhì)量

3、分配層析:依賴于分離化合物在流動相(溶劑)和固定相(凝膠)之間的分配,這主要由樣品的極性和溶劑的極性決定的。

 

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標簽:葡聚糖凝膠LH-60

 

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